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编号:13536019
细胞外囊泡的分离及鉴定方法(2)
http://www.100md.com 2019年9月1日 《新医学》 20199
     2. 透射电镜

    透射电镜可用于观察EV的表面特征。将纯化的EV置于悬浮液中,放在顯微镜样品格上,用醋酸铀和纤维素进行阴性染色后,透射电镜可清晰地显示EV的形态。镜下观察,EV呈现双层膜包裹的囊泡结构,常被描述为“杯子形状”,然而这也可能是处理样品时因烘干造成的假象。因此,这一方法不应作为EV的一个明确特征,也不能用于EV来源的鉴定。

    在电镜检查准备中,相较单一的阴性染色,还可对上述抗原进行单一或双重染色,然后使用具有抗体特异性的不同大小的金纳米粒子(例如一个抗体6 nm,另一种10 nm)来进行二次染色。在电子显微图像中,这些纳米粒子可以清楚地区分不同大小的EV[10]。此外,还可用标准的组织电子显微技术进行鉴定,通过抗体和组织切片的结合,得到更准确的EV存在的评估方法[11]。

    3. 根据粒子大小的鉴定方法

    根据粒子大小对EV进行鉴定最常用方法之一是NanoSight纳米粒子跟踪分析技术(NTA)。这一技术是在光学显微镜上安装了高清摄像机 ......
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