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编号:13169269
中国圆田螺多糖体外抗乙肝病毒的实验研究(2)
http://www.100md.com 2013年3月15日 《中国中药杂志》 2013年第6期
     2.4HBsAg,HBeAg检测 采用ELISA法,严格按说明书步骤操作。根据测定数据计算药物抑制抗原百分率、药物抑制抗原半数有效浓度IC50、选择指数SI,SI大于1以上者为有效,在1~2说明药物有效,但有一定毒性;大于两者效果较好,毒性较小;指数越大,则疗效越好,安全范围越大[2]。

    2.5HBV DNA检测 取上述收集的各孔细胞上清液各50 μL加至0.5 mL离心管中,再分别加入8%聚乙二醇(PEG)50 μL沉淀病毒,振荡混匀后12 000 r·min-1 离心10 min。弃上清,加入等体积DNA提取液12%chelex,振荡混匀后2 000 r·min-1 离心10 s,置100 ℃沸水浴10 min,再12 000 r·min-1 离心10 min,取上清液50 μL供PCR做模板。荧光探针定量PCR扩增引物:HBVFP 5′-TGTCCTGGTTATCGCTGG-3′;HBVRP 5′-CAAACGGGCAACATACCTT-3′;TaqMan探针序列:FAM-5′-TGTGTCTGCGGCGTTTTATCAT-3′-TAMRA;扩增目的片断:115 bp HBV基因组 p区 292 至 407 ......
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