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编号:13163990
商陆提取物醋制前后毒性作用的比较研究(2)
http://www.100md.com 2013年5月15日 《中国中药杂志》 2013年第10期
     2.4 巨噬细胞释放NO含量测定 颈椎脱位处死小鼠,75%乙醇浸泡3 min,用D,Hanks液充分洗出腹腔巨噬细胞,离心(2 000 r·min-1, R=8 cm)10 min,计数调到一定浓度后备用。将上述所制备细胞,按2×106个/mL铺到48孔板中,每组5个孔,共分为3组。其中2组分别加入0.5 g·L-1的70%醇浸膏、醋制70%醇浸膏各50 μL,空白加入相同体积的D,Hanks溶液,再各加入450 μL培养液,于37 ℃条件下放置4 h。

    NO含量测定方法:取100 μL上清液,加入0.4 mL混合试剂,混匀后37 ℃准确水浴60 min,再依次加入0.2 mL试剂三及0.1 mL试剂四,充分旋涡混匀30 s,室温静置40 min,3 500~4 000 r·min-1离心10 min,然后取上清液0.25 mL,加入0.3 mL显色剂,混匀,室温放置10 min ......
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