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编号:13153829
马尾松树皮提取物对顺铂所致体外人胚肾细胞毒性的保护作用(2)
http://www.100md.com 2013年9月1日 《中国中药杂志》 2013年第17期
     DCF荧光法测定细胞内ROS水平:细胞培养时采用无酚红的DMEM培养,细胞处理后,参照ROS测定试剂盒说明书操作,弃去培养液,装载DCFH-DA探针,37 ℃孵育50 min,每隔15 min轻摇混匀1次,使得探针与细胞充分接触。孵育结束后,以无血清无酚红DMEM培养液充分洗涤细胞,在多功能酶标仪上使用488 nm激发波长、525 nm发射波长,检测的DCF荧光强度即表征了细胞内的ROS水平。

    细胞内MDA和GSH含量,CAT酶活性,SOD酶活性测定:细胞培养结束后,收集6孔板上细胞,制成单细胞悬液,4 000 r·min-1离心5 min收集细胞,去上清,每孔加250 μL PBS,反复冻融4次,4 000 r·min-1离心5 min,取上清液加入试管中,严格按照MDA,GSH,CAT和SOD测定试剂盒所述方法测定[6-7] ......
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