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编号:13151542
仙茅及其有效成分对不同状态L02细胞PXR—CYP3A的影响研究(2)
http://www.100md.com 2013年10月1日 《中国中药杂志》 2013年第19期
     2.4细胞分组与处理 细胞状态较好时,调整细胞浓度,接种于6孔板,每孔含25×104个细胞。培养24 h后,待细胞贴壁,吸出原培养基。将6孔板分成正常大鼠血清组、虚寒大鼠血清组、正常大鼠血清+仙茅组、虚寒大鼠血清+仙茅组、正常大鼠血清+苔黑酚葡萄糖苷组、虚寒大鼠血清+苔黑酚葡萄糖苷组,共6组,每组3孔,正常组加含10%的正常大鼠血清培养基,虚寒组加含10%的虚寒大鼠血清培养基(2组均含100 U·mL-1青霉素,100 U·mL-1链霉素),仙茅水提液给药浓度为生药0.6 g·L-1,苔黑酚葡萄糖苷给药浓度为1×10-5mol·L-1,培养48 h,收集细胞,待测。

    2.5L02细胞中CYP3A活性检测 小心吸去培养液,PBS洗2次,加1 mL PBS,用细胞刮刀刮下细胞后,将细胞混悬液5 000 r·min-1离心10 min,小心吸出上清,每管加200 μL pH 7.4的甘油磷酸缓冲液,制成细胞悬液 ......
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