2.3 分组 使用DMEM完全培养基培养海马神经元至第3天时，更换为不同条件的培养基，分为4组：正常组、高糖组、氯化锂组和Rb1组。正常组采用完全培养基培养(含25 mmol·L^-1葡萄糖)，其余均加50 mmol·L^-1葡萄糖。氯化锂组另加1 mmol·L^-1氯化锂，Rb1组另加1 μmol·L^-1人参皂苷Rb1。

    2.4 Western blotting法检测神经元内pGSK3β，tGSK3β及IDE蛋白表达水平 将细胞悬液接种到预先用PDL包被的T25瓶中，细胞密度1.5×10⁶个/瓶，6 mL/瓶。待细胞生长至第3天，更换不同条件的培养基。继续培养72 h后，除去培养基，收集细胞。200 μL/孔RIPA裂解液裂解细胞。利用伯乐公司的 Bio-Rad DC Protein Assay Kit 1(Catalog：5000-111)试剂盒测定蛋白浓度。电泳，转膜(转膜缓冲液1×Transfer buffer：Tris 3.02 g，氨基乙酸14.4 g ......