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编号:12614203
槲皮素抑制乳腺癌细胞迁移侵袭及分子机制研究(3)
http://www.100md.com 2015年3月15日 中国中药杂志 2015年第6期
     1.7槲皮素对MDA-MB-231整合素家族、基质金属蛋白酶表达的影响取对数生长期的MDA-MB-231细胞用0.25%胰蛋白酶消化制成1×10/1个/mL细胞悬液,接种于培养皿中,每个培养皿各加入1mL细胞悬液,其余为含10%胎牛血清的DMEM培养液,共10mL体系。细胞分组及给药方式同上,37℃,5%CO2培养箱培养24h后提取蛋白并采用BCA法测定蛋白浓度。变形后取50μg上样,用10%分离胶、5%浓缩胶电泳,0.02A每块胶,至溴酚蓝消失,之后转到PVDF膜上。一抗1∶500,4℃孵育过夜后加1∶1万辣根过氧化物标记的羊抗兔IgG,加入化学发光试剂[14]。用Kodak胶卷曝光;以GAPDH作为内参,做灰度分析,实验重复3次。

    1.8虚拟评价槲皮素与整合素蛋白的结合力采用Autodock分子对接软件包(版本4.2)进行分子对接,将那曲肝素与上P-selectin进行计算机虚拟结合,在此基础上评价槲皮素与整合素蛋白(Integrinβ3及Integrinβ1)的结合参数 ......
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