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编号:13078771
白木香转录因子AsMYB1和AsMYB2克隆及表达分析(3)
http://www.100md.com 2017年10月8日 《中国中药杂志》 2017年第17期
     3.1 白木香AsMYB1和AsMYB2基因全长cDNA的克隆

    根据白木香愈伤组织转录组测序结果,以白木香愈伤组织的cDNA为模板进行扩增,利用PCR方法扩增得到2条约1 200 bp的条带,见图1。将其连接到pMD19T载体转化大肠杆菌DH5α,测序结果经过NCBI的BLAST比对,确定2个扩增产物是MYB基因的全长,2个基因分别命名为AsMYB1,AsMYB2。

    MYB转录因子以其N端特有的MYB保守结构域而得名,MYB 结构域是一段约51~52个氨基酸的肽段,由一系列高度保守的氨基酸残基和间隔序列组成,每个MYB结构域折叠成螺旋转角螺旋M.Marker; 1.AsMYB1基因的扩增片段; 2.AsMYB2基因的扩增片段。

    空间结构,其中含有3个色氨酸残基,这3个残基被18~19个氨基酸残基隔开,起着疏水核心的作用[6]。MYB 转录因子一般由3个保守的功能域组成:1个 DNA 结合结构域,1个转录激活结构域,以及1个不完全界定的负调节区[7]。根据转录因子中 MYB 结构域数量的不同,MYB家族可划分为不同的亚家族,即R1MYB(单一MYB结构域),R2R3MYB(2个重复MYB结构域),R1R2R3MYB(3个重复MYB结构域)及4RMYB(4个MYB结构域)[8] ......
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