补体抑制活性物质鱼腥草总多糖中内毒素的去除(3)
2.5 经典途径抗补体活性测定[5]采用细胞溶血法测定抑制补体激活经典途径50%溶血所需最小供试品浓度,即CH50。
3 结果
3.1 内毒素标准品回归方程的建立
当LPS浓度范围为0.01~0.1 EU·mL-1时,回归方程为Y=0.872 9X-0.040 9,R2=0.992 8;LPS浓度范围为0.1~1.0 EU·mL-1时,回归方程为Y=6.183 1X-0.002 5,R2=0.995 3。
3.2 鱼腥草总多糖中内毒素的去除
3.2.1 凝胶过滤色谱法与亲和吸附色谱法联用 将鱼腥草总多糖经Sephacryl S300柱洗脱后的洗脱液6~10管合并、透析、冻干,记为H1;将H1样品再次经AffiPrep Polymyxin柱纯化,其洗脱液的3~5管合并、透析、冻干,记为H1′, 见图1。
3.2.2 疏水色谱法与亲和吸附色谱法联用 将鱼腥草总多糖经Penyl Sepharose 6 FF柱洗脱后的洗脱液6~13管合并、透析、冻干 ......
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