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编号:13388652
脂肪干细胞抑制UVB诱导的细胞外基质降解的机制研究(3)
http://www.100md.com 2019年3月15日 《中国美容医学》 2019年第6期
     1.4 ADSCs皮下移植及获取组织样本:将5×106个ADSCs悬浮在0.5ml PBS中,用30号针头注射到UVB+ADSCs组照射区域(1cm×1cm)的小鼠背部皮肤的皮内和皮下层。通过相同的方法向对照组和UVB组注射等体积的PBS。间隔14d进行第2次注射。在最后一次ADSCs移植后2周通过过量吸入麻醉剂处死所有小鼠。从各组小鼠背部注射部位获得皮肤样品(1cm×1cm)。

    1.5 HE和Mason染色:皮肤样本经过固定和石蜡包埋后,三组皮肤切片接受HE和Masson染色。每个HE染色的切片上选择5个位置测量表皮厚度,并比较平均值。通过Masson三色染色检测各组真皮胶原密度。

    1.6 免疫荧光分析:将皮肤样品切片用20%蔗糖脱水6h,然后用30%蔗糖脱水过夜。将脱水样品包埋在最佳切割温度的化合物(Sakura Finetechnical Co.,Ltd.,Tokyo,Japan)中。将嵌入的样品在-80℃冰箱中冷冻。将冷冻的皮肤样品切成6mm厚的切片。将切片在PBS中浸泡5min ......
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