人牙周韧带细胞在SGBG/PHBV三维支架材料上分泌功能的研究(1)
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【摘要】 目的 研究人牙周韧带细胞(periodontal ligament cells PDLCs)在溶胶-凝胶生物活性玻璃(sol-gel bioglass,SGBG)/聚羟基烷酸酯(poly-3-hydroxy butyrate-co-3-hydroxy valerate,PHBV)三维支架上的分泌功能,为牙周组织工程支架的选择提供依据。方法 通过体外细胞培养实验,人牙周韧带细胞与SGBG/PHBV体外三维培养的直接接触法,测定上清液羟脯氨酸含量,检测材料对细胞分泌功能的影响。结果 实验组上清液羟脯氨酸含量测定值与对照组有显著性差异,材料不影响细胞的分泌功能,同时支架材料的三维结构更能促进细胞的分泌功能。结论 SGBG/PHBV作为支架材料,有良好的生物相容性,有望应用于牙周组织缺损的组织工程修复。
【关键词】
溶胶-凝胶生物活性玻璃/聚羟基烷酸酯;人牙周韧带细胞;牙周组织工程
The study of the secretory function of Human PDLCs on the scaffold material
CHEN Jian-Hong,HUANG Nan-Nan,TANGQian,et al.Department of Stomatology,the Third Affiliated Hospital of Sun Yat-sen University,Guangzhou,Guangdong 510630,China
【Abstract】 Objective The biocompatibilitybetween SGBG/PHBVandPDLCswereinvestigated toprovidea basis for the choice of the scaffold materialof periodontal tissue engineering.Methods Human PDLCs cultured in vitro were collected and seeded on the three-dimensional scaffolds of SGBG/PHBV,And the effection of the SGBG/PHBV on cell secretory function was observedby spectrophotometry which assayed the biochemical indexs-Hyp in supernate.Results The significant difference ofHYP in supernate between the experiment group and the control group(P<0.05)indicated that the scaffoldhad accelerating effects onthe cell secretory function.Conclusion Provided with the satisfactory biocompatibility with PDLCs,SGBG/PHBV is valued to further study as the scaffolds of periodontal tissue engineering.
【Key words】
SGBG/PHBV;PDLCs;Periodontal tissue engineering
牙周组织在牙周病变过程中因炎症而被破坏,如何获得牙周组织结构和功能的重建-即牙周组织的再生,是牙周病研究领域的重要课题。牙周组织缺损的修复主要针对牙周韧带、牙骨质和牙槽骨的修复。应用组织工程修复牙周组织缺损为牙周病的治疗开辟了一条新途径。
本实验中,我们选用第四代的人牙周韧带细胞作为种子细胞,溶胶-凝胶生物活性玻璃(sol-gel bioglass,SGBG)/聚羟基烷酸酯(poly-3-hydroxy butyrate-co-3-hydroxy valerate,PHBV)作为支架材料,通过细胞支架体外复合培养的直接接触实验,检测材料对人牙周韧带细胞分泌功能的影响,为牙周组织工程支架材料的选择提供实验依据。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 材料来源 SGBG/PHBV(华南理工大学材料学院提供)。
1.1.2 主要仪器和试剂 全自动CO2培养箱(Forma,USA),医用超净工作台(苏州净化仪器厂),倒置相差显微镜(Nikon,Japan),纯水系统(Millipore,USA),高速离心机(飞鸽,中国),高糖DMEM培养液(Gbico,USA),胎牛血清(PAA,美国),胰蛋白酶(Sigma,USA),MTT3-(4,5-2甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(Sigma,USA),抗波形丝蛋白单克隆抗体(博士德,中国),抗细胞角蛋白单克隆抗体(博士德,中国),倒置相差显微镜及照相系统(Nikon,Japan),扫描电镜(PHILIPS XL-30,Holand),羟脯氨酸试剂盒(南京建成,中国) ......
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