自体骨髓干细胞移植结合口服中药治疗慢性肝功能衰竭的研究(1)
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【摘要】 目的 探讨自体骨髓干细胞移植结合口服中药治疗慢性肝功能衰竭的疗效。方法 自体骨髓干细胞在体外分离后移植至体内在肝脏中生长分化为具有功能的肝细胞,结合口服中药治疗。结果 使损伤的肝功能恢复重构。结论 自体骨髓干细胞移植，使损伤的肝功能恢复重构，不存在免疫排斥反应，安全有效，价格低廉，具有良好前景。
【关键词】
自体骨髓干细胞移植; 慢性肝功能衰竭; 中药
【Abstract】 Objective To investigate the autologous bone marrow stem cell transplantation combined oral administration of traditional Chinese medicine treatment of chronic liver failure effects Methods of autologous bone marrow stem cells in vitro after the separation from the body in the liver transplant growth and differentiation of functional liver cells，combined treatment of oral medicine The result that functional recovery of liver injury reconstruction Conclusion Autologous bone marrow stem cell transplantation，so that functional recovery of liver injury reconstruction，there is no immune rejection response，safe，effective，inexpensive，has good prospects
【Key words】
Autologous bone marrow stem cell transplantation; Chronic liver failure; Chinese medicine
研究应用患者自体骨髓干细胞作为供体，在体外分离纯化后移植至患者体内，使干细胞在肝脏中生长分化为具有功能的肝细胞[15]，使损伤的肝功能得以恢复和重构，为干细胞的进一步治疗研究打下基础。
1 资料与方法
11 病例选择 160例慢性乙型重型肝炎为我院住院患者，年龄22~68岁；诊断符合2000年病毒性肝炎防治方案诊断标准[6]。随机分组120例患者行自体骨髓干细胞移植治疗，40例患者作为对照，给予综合基础治疗。所有治疗患者在知情同意的情况下，签定《知情同意书》，两组基本情况均无显著性差异。
12 排除病例 肝性脑病、消化道出血、重度感染或大量腹水等严重并发症,半年内未使用过其他抗病毒药和其他免疫调节剂。其他病毒感染、酒精性、药物性肝病。
13 主要试剂及仪器 超净工作台(北京半导体设备一厂)：台式低温高速离心机(美国Heraeus公司)；二氧化碳孵箱(美国Heraeus公司)；倒置显微镜(日本Olympus公司)流式细胞仪(FACSCalrbur,美国BD公司)LCVPLUS血管造影仪(美国GE公司)。Percoll分离液(美国Sigma公司)；DMEM培养基(美国Hyclone公司)。
14 骨髓干细胞的采集 患者行局部麻醉消毒，在无菌条件下，以18号骨髓穿刺针从髂后上棘进行穿刺，抽取骨髓50~10 ml，以4000 U肝素抗凝，避免污染。
15 骨髓干细胞的分离 参照文献[7]的方法，患者骨髓离
作者单位：273500山东省邹城兖矿集团总医院消化内科
心去除脂肪层，用等量DMEM培养液稀释骨髓，制成细胞悬液。将骨髓轻轻的加到密度1073/ml的percoll分离液上，在室温下1200r/min，离心25 min。吸取界面细胞层，用等渗盐水洗脱，1500 r/min×5 min离心3次，等渗盐水重悬细胞，镜下计数所用细胞为10×107个ml，制成体积为10 ml悬液，置于37℃二氧化碳孵箱待用。
16 骨髓干细胞移植 患者在局部麻醉下，行肝动脉介入，在X线监视下，将分离的骨髓干细胞5×108~5×109/ml。通过导管从肝动脉缓慢给入病变部位。之后用10 ml等渗盐水冲洗管腔。
17 口服中药 大黄、蛰虫、大腹皮、牛膝、莪术、三棱、槟榔、鸡内金、桃仁、醋芫花、水蛭、虎杖、黄芩、甘草、黄芪、丹参、茵陈等随证加减[8]。
18 肝功能检查 对照组和移植组患者在移植后1、4、8、12周进行肝功能检测，
分别检测丙氨酸氨基转移酶(ALT)，总胆红素(Tbil)，白蛋白(Alb)，凝血酶原活动度(PTA)等指标。在1、4、8、12周观察腹水，食欲，体力，腹胀，睡眠等症状改善情况，及术后的不良反应情况。
19 统计学分析 采用t检验。
2 结果
21 自体骨髓干细胞移植结合口服中药后患者肝功能的改变 自体骨髓干细胞移植后患者肝功能在移植1、4、8、12周后，肝功能明显改善，和对照组相比有明显差异，表明骨髓干细胞移植治疗后，患者肝功能逐步改善，见表1。
22 自体骨髓干细胞移植结合口服中药后患者凝血机制的改变：移植组在干细胞移植后PTA逐渐上升，由术前平均259%上升至术后12周的526%；而对照组患者没有明显改善，表明骨髓干细胞移植治疗后，患者凝血机制有所改善。
23 自体骨髓干细胞移植对患者短期生存率的改变 患者在移植后1周的生存率为100%，在4周内死亡2例，生存率为980%：在12周内死亡6例，生存率950%。为移植患者在1周后，生存率下降至867%；4周后降至800%；12周后降至600%
24 自体骨髓干细胞移植结合口服中药后患者症状的改善 移植后大多数患者有明显的症状改善，移植后食欲改善者90例 ......
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