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编号:12150809
两种培养基在健康人群中沙门菌检测的比较
http://www.100md.com 2011年11月5日 刘继倩 宋驰萍 骆玲飞 王海青 欧阳霖
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    参见附件(1612KB,2页)。

     【摘要】 目的 比较沙门菌科玛嘉显色培养基(简称CAS)和传统WS培养基在健康人群体检中沙门菌检测的效果。方法 用上述两种培养基对917件肛拭标本进行沙门菌的分离鉴定,比较其分离效果。结果 从917件标本中,共分离出18株沙门菌,WS培养基的阳性率为0.55%,CAS培养基的阳性率为1.42%(χ2=6.13,P<0.05),二者差异有统计学意义。 结论 CAS培养基可提高沙门菌的检出率,是理想的沙门菌选择性培养基,推荐使用CAS作为分离沙门菌的培养基。

    【关键词】

    沙门菌; WS培养基;科玛嘉显色培养基(CAS)

    沙门菌属是肠杆菌科中一类重要的人畜共患病病原体,食品是其传播主要媒介[1-3]。至2007年底,发现的感染沙门菌已近3000个血清型,我国共发现322个不同血清型。传统的用于沙门菌分离的培养基都是依据其生化特性而制定的,如不发酵乳糖,产生硫化氢等。而法国科玛嘉公司(CHROM agar)的沙门菌显色培养基CAS,在其培养基上培养24 h 后呈现紫色菌落,肠杆菌科其他菌落呈现无色或蓝色。为提高沙门菌检出率,本文用上述两种培养基作为沙门菌分离的培养基,比较其分离效果。

    1 材料与方法

    1.1 标本来源

    闵行区饮食服务及公共卫生从业人员健康体检,采集肛拭标本共917份。

    1.2 培养基及试剂

    CAS由法国科玛嘉微生物技术有限公司(CHROM agar)提供;卡里-布莱尔转运培养基(Cary Blair Transport Medium)、WS 培养基、SF 增菌液、肠道双糖琼脂等均由上海市疾病预防控制中心提供。沙门菌诊断血清56种,由卫生部成都生物制品研究所制备。

    1.3 实验方法

    依据WS 271-2007 附录B《感染性腹泻诊断标准》。

    1.3.1 增菌培养 将肛拭卡里于SF增菌液,37℃培养过夜。

    1.3.2 平板分离 将增菌液转种于WS培养基和科玛嘉培养基两种平板上,于37℃培养24 h。则在WS 培养基菌落特点为无色半透明,中等大小、圆形、湿润,边缘整齐,中心黑色[4]。

    1.3.3 生化试验 挑取可疑菌落转种到双糖管作初步筛选,主要观察生化指标,即葡萄糖产酸产气,甘乳糖+,乳糖-,蔗糖-,硫化氢+,动力+。

    1.3.4 血清学分型鉴定 沙门菌的分型鉴定主要采用血清学的方法,按照考夫曼-怀特沙门菌属抗原表判定菌型鉴定的方法。从营养琼脂斜面上挑取可疑菌落分别与A-F 多价O血清和O因子血清及H 因子血清进行玻片凝集试验[5],若凝集即为阳性,并用生理盐水作阴性对照。

    2 结果

    2.1 两种培养基阳性率比较

    用WS培养基检出沙门菌的阳性率为0.55%,用CAS培养基检出沙门菌的阳性率为1.42%,结果表明CAS培养基比传统的WS培养基检出沙门菌的阳性率高,(见表1)。

    2.2 两种培养基的可疑阳性率比较

    WS培养基可疑阳性率比较为10.91%,CAS培养基可疑阳性率为2.51%,表明WS培养基可疑阳性率明显高于CAS培养基可疑阳性率,(见表2)。

    2.3 可疑阳性中检出真阳性率5.00%,CAS培养基真阳性率为56.50%,(见表3)。

    根据上述表和表3,可以判断出WS 培养基 可疑阳性率 高于CAS培养基可疑阳性率,但从可疑阳性中检出沙门菌真阳性率要比CAS培养基低。

    3 讨论

    3.1 阳性检出率比较 经本次用两种不同培养基对健康人群肛拭标本中的沙门菌进行检测,结果是WS培养基的阳性率为0.55%,CAS培养基的阳性率为1.42%,表明用CAS培养基检测沙门菌的阳性率明显高于WS培养基,显示了CAS培养基不仅可提高阳性率,还对于临床及早发现传染源,切断传播途径,防止食物中毒的发生提供依据。

    3.2 两种培养基在实际中的应用 目前应用于沙门菌分离培养的培养基很多,绝大多是大肠埃希菌、枸菌菌株在这些培养基上发育良好,而沙门菌的阳性率偏低。另一方面,用传统WS培养基分离时,各种菌落形态、颜色单调,须凭经验鉴别,特别是不能区别缓慢发酵乳糖的菌株,使得可疑菌落太多。

    CAS培养基克服了上述诸多的不足,在培养基上形成紫色或紫红色直径1 mm的特征性菌落,明显区别于其他杂菌,本次试验沙门菌的可疑阳性率为2.51%,可疑阳性中检出的真阳性率为56.50%。因此用CAS培养基 代替传统WS 培养基可以减少可疑菌落的挑取 ......

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