pGL3—EPO—α—MHC启动子荧光素酶报告基因质粒的构建及缺氧调控功能考察(2)
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缺氧诱导反应因子(HIF-1)是介导细胞产生缺氧应答反应的主要元件。在缺氧条件下,HIF-1与缺氧反应元件(HRE)相互作用,启动相应基因的表达,因此有报道将HRE作为心肌缺血治疗基因的表达调控元件[10-11]。α-MHC启动子是目前研究较多的心肌特异性启动子之一,可以提高基因在心肌组织表达的专属性[12]。EPO是HIF-1的响应基因,最小缺氧反应单位约为31 bp,但应用单个EPO HRE作为缺氧反应调控元件效率较低,将多个HRE串联应用,缺氧调控效率可得到明显提高[13-14],因此本研究选用9×EPO HRE作为α-MHC启动子的缺氧反应调控元件。
H9C2是一种经改造的心肌细胞系,具有传代的能力,在心肌细胞缺氧损伤及药物保护的研究中应用广泛[15]。本研究在H9C2细胞常氧和缺氧模型中考察了EPO-α-MHC启动子调控报告基因表达的能力,结果表明该启动子具有缺氧诱导表达上调的调控功能,在心肌缺血的基因治疗中具有一定的应用潜力。
[参考文献]
[1] Molkentin JD,Jobe SM,Markham BE. Alpha-myosin heavy chain gene regulation: delineation and characterization of the cardiac muscle-specific enhancer and muscle-specific promoter[J] ......
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