1.2 癌组织中Lin28B蛋白检测

    采用免疫组织化学方法检测癌组织和癌旁组织中Lin28B蛋白的表达[5]。鼠抗人Lin28B单克隆一抗从Abcam公司(ab71415)购买，工作浓度1∶50，磷酸盐缓冲溶液(phosphate buffer solution，PBS)代替一抗稀释液作为阴性对照，具体染色实验步骤依据试剂盒进行[6]。癌组织和癌旁组织每组4张切片，每张切片采用高倍显微镜选取5个视野进行计数，每个视野分别对100个肿瘤细胞进行计数。以阳性细胞染色深度作为评定标准，并计算阳性染色率。细胞膜或者细胞浆中出现棕黄色或者黄色的颗粒为阳性染色，当阳性染色细胞数/总细胞数≤10%时，为阴性表达(-)，阳性细胞数/总细胞数>10%。

    1.3病理特征分析方法

    组织分化程度分为Ⅰ级(高分化，G1)、Ⅱ级(中分化，G2)、Ⅲ级(低分化，G3)，分级愈高，恶性程度愈高。肿瘤分期基于原发肿瘤的大小，T1：<2 cm；T2：2～5 cm；T3：>5 cm；T4：肿瘤存在浸润，如侵犯皮肤、胸腔。Ki67用免疫组织化学染色法检测，检测过程和结果判定按照Ki67检测抗体(购自ABCA公司)说明书进行。阳性标准为细胞核内棕黄色颗粒，阳性细胞数<5%为阴性，>5%为阳性。

    1.4统计学处理

    数据采用SPSS 19.0软件进行统计学分析 ......