当前位置: 首页 > 期刊 > 《中国当代医药》 > 2019年第8期
编号:13347810
ABCG2在非小细胞肺癌吉非替尼耐药中的作用研究(2)
http://www.100md.com 2019年3月15日 《中国当代医药》 2019年第8期
     细胞存活率=(实验组A值/对照组A值)×100%,耐药指数=耐药细胞半抑制浓度(IC50)/亲代细胞IC50

    1.2.3 ABCG2、p-AKT蛋白在A549、A549/GR细胞的表达 用吉非替尼分别处理A549、A549/GR,细胞裂解后,提取总蛋白,应用BCA法行蛋白定量。在120 V下持续电泳至样品到达凝胶底部。半干转膜仪转移至聚偏二氟乙烯(PVDF)膜上,洗膜后,剪下相应条带,分别放入GAPDH、ABCG2、p-AKT多克隆一抗中(1∶1000稀释),4℃冰箱孵育过夜。次日,将PVDF膜从一抗中取出,洗膜缓冲液(TBST)洗脱3次,置于二抗(1∶2000稀释)中,于摇床上摇动,洗脱3次。最后将配好的电化学发光(ECL)液滴加覆盖PVDF膜。使用超灵敏化学发光仪进行曝光,选择合适曝光时间,观察分析曝光的条带情况。

    用浓度为100 ng/ml的胰岛素样生长因子-1(IGF-1)及浓度为20 μmol/L的LY294002分别处理A549、A549/GR细胞48 h,用上述同样方法检测蛋白的表达。

    1.2.4检测细胞中ABCG2外排 取A549细胞及A549/GR细胞作为对照 ......
上一页1 2 3 4下一页

您现在查看是摘要页,全文长 4322 字符