雷帕霉素对大鼠缺血再灌注肾细胞凋亡和P53蛋白表达的影响(2)
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1.7 统计学处理
采用SPSS13.00软件,数据均以()表示,多组间均数比较,采用单因素方差分析,以P<0.05为有统计学意义。
2 结果
2.1 建模成功后各组肾脏形态学变化
肉眼下:假手术组正常;药物组轻度淤血和水肿;手术组严重淤血、水肿,髓质明显变苍白。光镜下:假手术组各组无病理改变。手术组再灌注不同时间的肾脏病理改变各不相同。0 h组:肾脏正常。24 h组:肾小管腔被大量坏死细胞残留物质堵塞,肾小管的结构轮廓尚见,大量肾小管上皮细胞呈空泡样肿胀,部分坏死脱落,基底膜仅剩轮廓。48 h组:肾小管开始修复,肾小管中坏死的堵塞物质明显减少。72 h组:部分肾小管结构完全修复,管腔干净,通畅,坏死物质极少。光镜下,手术组各个时相的病变均较药物组严重,药物组肾小管上皮细胞仅呈空泡样肿胀、少许颗粒样变性,无坏死,间质无异常。见图1~2。
2.2 细胞凋亡率检测
TUNEL阳性细胞的细胞质无染色,细胞核黄褐色。肾小球阴性表达;肾小管阳性表达,髓质明显。见图3~4。图像分析阳性表达后。见表1。假手术组呈极弱阳性表达;手术组的细胞阳性率明显增加(P<0.05);药物组的细胞阳性率相对手术组显著减少(P<0.05)。
2.3 P53蛋白的表达
P53阳性细胞细胞质无染色,细胞核黄褐色,肾小球阴性表达;肾小管阳性表达,髓质明显。见图5~6。图像分析阳性表达后。见表1。假手术组呈极弱阳性表达;手术组的细胞阳性率明显增加(P<0.05);药物组的细胞阳性率相对手术组显著减少(P<0.05)。
3 讨论
3.1 细胞凋亡和肾脏缺血再灌注损伤关系
在动物实验中发现,肾小管上皮细胞凋亡在肾脏缺血再灌注损伤中会大量出现[5],对移植后的尸体肾活检,发现了同样的情况[6],而且供肾冷缺血时间与细胞凋亡和缺血再灌注损伤
织的表达(SABC×400) 织的表达(SABC×400)
呈正相关[7]。肾脏缺血再灌注损伤后细胞凋亡的机制极其复杂,氧自由基[8]、钙离子超载[9-10]、炎性因子和炎症介质[11]、与凋亡相关的基因 ......
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