中空海藻酸钙固定化白色链霉菌转化去氢表雄酮的研究(2)
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3 结果与分析
3.1 中空海藻酸钙胶囊的制备与优化
实验通过将CMC和CaCl2组成的阳离子溶液向SA溶液中滴加，成功完成了中空海藻酸钙胶囊的制备，获得的中空海藻酸钙胶囊如图1。
球形的胶囊有利于保持胶囊的均匀，从而有助于营养物质的均匀扩散和产物的有效排出。而一定机械强度的胶囊可以防止胶囊在摇床上培养菌时破裂，菌体外泄。通过单因素实验获得最佳的胶囊制备条件：SA浓度1%(w/v，1g/100 mL，下同)、CMC浓度1%、CaCl2浓度8%、滴加速度210滴/min、搅拌时间20 min、滴加高度8 cm、大孔径的针头。在此最优条件下胶囊的成球能力很好，直径：(10.0±1.2)mm， 内径：(8.2±0.9)mm，厚度：(0.9±0.13)mm，机械强度：(11.50±1.8)N。
3.2 中空海藻酸钙固定化白色链霉菌转化DHEA
采用3.1中制备胶囊的最佳条件，完成了对白色链霉菌菌体的固定化如图2[8]。由结果可知，充满白色链霉菌菌体的胶囊呈现黄色，不透明，这与空的中空海藻酸钙胶囊对比明显。将上述固定化胶囊加入含有60 mL液体PDA培养基的250 mL三角瓶中，再加入DHEA进行生物转化，分别在三用紫外仪和显色条件下获得的转化结果如图3。固定化白色链霉菌对DHEA具有转化作用，虽然相对于自由菌其转化率偏低，但是固定化白色链霉菌对DHEA表现出了明显的转化。因此通过白色链霉菌固定化的方法来实现DHEA的生物转化是可行的，并且可以通过条件优化和固定化菌的重复利用来实现转化率的提高[9]。
3.3 固定化白色链霉菌转化DHEA条件优化
利用单因素实验测定了温度、pH、转速、转化时间、固定化的自由菌的生长状态对固定化白色链霉菌转化DHEA的影响结果如图4。各因素对固定化白色链霉菌转化DHEA的结果影响很大。通过对各因素优化之后，固定化白色链霉菌对DHEA的转化率达到40%左右，使得其转化率有一个明显的提高。实验过程获得的最优转化条件为：对生长两天的白色链霉菌进行固定化 ......
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