CD40—CD40L在儿童持续性免疫性血小板减少症发病机制中的作用研究(2)
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参见附件。
鼠抗人CD40-FITC、CD40L-PE均购自eBioscience公司,流式细胞仪 FACScan,美国BD公司。
1.3 实验方法
1.3.1 CD40、CD40L的检测 采用密度梯度离心法提取外周血单个核细胞,取100?L单个核细胞悬液分别加入含单克隆荧光标记抗体CD40-FITC、CD40L-PE各10μL的试验管中,混匀后20~25℃避光孵育20~30min,PBS液洗涤后上机检测,用CELL Quest软件分析。
1.3.2 PAIgG的检测 采用ELISA法,PAIgG含量测定试剂盒购自上海太阳生物技术有限公司。
1.4 统计学分析
采用SPSS16.0统计软件进行分析,实验数据以()表示,样本符合正态分布,组间比较用单因素方差分析,相关分析用Pearson线性相关分析方法,P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 CD40、CD40L的表达情况
(1)与对照组比较,CD40在治疗前和治疗后的表达均增高(t=8.327,P<0.01;t=5.549,P<0.05),CD40L在治疗前和治疗后的表达均增高(t=5.098,P<0.05;t=4.264,P<0.05);(2)CD40在治疗前表达高于治疗后(t=3.363,P<0.05),CD40L治疗前后表达差异无统计学意义(t=0.758,P>0.05)。见表1。
表1 持续性ITP患儿外周血单个核细胞CD40、CD40L的表达情况(,%)
组别例数CD40CD40L
治疗前20 9.84±2.69*# 6.38±2.36▲
治疗后20 8.27±1 ......
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